色谱柱的?;ぶ嗑没灰淮??
一、恒谱生色谱?;ぶ淖饔?/span>
恒谱生色谱?;ぶ苡行Ю菇匮分械脑又省⑶勘A粑镏屎涂帕N锏?,防止它们进入色谱柱,降低色谱柱受污染的风险,显著延长色谱柱的使用寿命。其具有诸多优点,如省去中间的连接管路和接头螺丝,操作更省心、便捷;可提高色谱分析灵敏度和分离度;阻力小,几乎零背压;能大大减少柱外效应带来的谱带展宽;安装快速简单,采用手紧式安装;可减少流路扩散;柱芯成本低,能进一步延长色谱柱的使用寿命等。
二、影响恒谱生色谱?;ぶ恢芷诘囊蛩?/span>
(一)样品的性质
杂质含量与成分:若样品中杂质含量高、成分复杂,保护柱负担加重,需更频繁更换。例如生物样品中的蛋白质、核酸等大分子物质,以及环境水样中的有机污染物和重金属离子络合物等,都易快速污染?;ぶ?/span>
化学性质:样品的酸碱性、极性等化学性质也会影响?;ぶ倜G克嵝曰蚯考钚缘难房赡苡氡;ぶ奶盍戏⑸Х从Γ贾绿盍闲阅芟陆?,缩短更换周期。
(二)进样频率与进样量
进样次数:进样次数越多,?;ぶ菇氐脑又试蕉啵盍系奈轿坏阒鸾ケ徽季?,过滤效果会逐渐降低。当进样达到一定次数后,即使样品相对清洁,也可能需要更换?;ぶ?/span>
进样量:进样量过大,会使更多杂质进入保护柱,加速其污染。因此,在保证分析灵敏度的前提下,应尽量控制进样量。
(三)流动相组成
有机溶剂比例:流动相中有机溶剂比例较高时,可能会溶解保护柱中的填料或使其膨胀,影响?;ぶ阅芎褪倜?。
缓冲盐浓度:使用含有高浓度缓冲盐的流动相时,缓冲盐可能在?;ぶ谖龀鼋峋?,堵塞填料孔隙,导致柱压升高,此时需要及时更换保护柱。
(四)分析方法与条件
分离模式:不同的色谱分离模式对?;ぶ囊蠛退鸷某潭炔煌@?,在正相色谱中,样品和流动相的极性较强,可能对?;ぶ奶盍喜洗笥跋?而在反相色谱中,有机溶剂的使用可能导致填料的溶胀和流失。
流速与压力:高流速和高压力会使?;ぶ诘奶盍鲜艿礁蟮某寤髁?,容易导致填料的破碎和流失,从而缩短?;ぶ氖褂檬倜?。
三、恒谱生色谱?;ぶ坏呐卸戏椒?/span>
柱效监测:定期测定色谱柱的柱效,如理论塔板数、峰对称性、分离度等参数。如果发现柱效明显下降,且排除了色谱柱本身的问题,很可能是?;ぶ枰涣?。
压力变化:观察系统压力的变化,如果在其他条件不变的情况下,压力逐渐升高,可能是?;ぶ氯蛱盍涎故档贾碌?,需要考虑更换?;ぶ?。
峰形变化:当峰形变宽、拖尾、前倾或出现异常峰时,除了色谱柱本身的原因外,?;ぶ奈廴净蛩鸹狄部赡苁堑贾路逍伪浠囊蛩刂?,可作为判断?;ぶ欠裥枰坏囊谰葜?。
四、?;ぶ话愀恢芷诮ㄒ?/span>
在常规的高效液相色谱分析中,如果样品相对清洁,进样量和进样次数适中,流动相组成合理,分析条件温和,恒谱生色谱?;ぶ话憧梢允褂?3-6 个月左右。但如果样品复杂、进样频繁或分析条件较为苛刻,则可能需要 1-3 个月更换一次。在实际使用中,应根据具体的分析情况和上述判断方法,灵活确定?;ぶ母恢芷凇?/span>
发布于: 2025-01-04